吲哚菁绿试验是一种常用的生物学实验方法,用于检测细胞的活性和死亡情况。下面将介绍吲哚菁绿试验的实验步骤。
实验材料:
1. 吲哚菁绿(JC-1)荧光染料
2. 细胞培养物
3. PBS缓冲液
4. 离心管
5. 荧光显微镜
实验步骤:
1. 将细胞培养物分别加入两个离心管中,每个离心管中细胞量应相等。
2. 向每个离心管中加入适量的PBS缓冲液,并离心5分钟,去除上清液,留下沉淀细胞。
3. 向每个离心管中加入适量的吲哚菁绿荧光染料,用PBS缓冲液调节荧光染料浓度,使吲哚菁绿的终浓度为2μM,轻轻振荡混合。
4. 将含有吲哚菁绿的细胞培养物放入荧光显微镜中观察,荧光显微镜应使用激光波长为488nm的激光源。
5. 在荧光显微镜下观察细胞的荧光信号。正常活细胞的荧光信号为红色,而死亡细胞的荧光信号为绿色。
总之,吲哚菁绿试验是一种简单易行的细胞活性检测方法,可以通过荧光显微镜观察细胞活性和死亡情况,是生物学研究中常用的实验方法之一。